Две методе за цепање пептида из чврстих-фазних смола

чврста фаза Фмоц Након хемијске синтезе пептида, постоји много метода цепања. Сада ћемо представити два основна типа која обично користе сви.

Ставите суву смолу у тиквицу за мућкање и додајте одговарајућу количину чистача (Сцавенгерс) Реагенс за цепање трифлуоросирћетне киселине (ТФА), 10-25мл/г смоле, поклопите и повремено протресите на собној температури. Филтрирајте смолу са новом ТФА. Исперите смолу 2-3 пута, помешајте филтрат и у капима додајте 8-10 пута више запремине глацијалног етра. Понекад се део може испарити са ТФА Добија се сирови пептидни талог. Диетил етар се може охладити ледом да би се побољшала ефикасност преципитације. На крају, сакупите исталожени сирови пептид.

Применљива смола:кинг смола или Ринк Амид Ресин

1% ТФА:

ће 1 г Полипептидна-висећа смола је додата у раствор који садржи 1% ТФА. Стаклена боца за протресање раствора дихлорометана је затворена и мућкана 2 минута. Користите азот да сипате филтрат у другу нову балончићу за мућкање метанола која садржи 10% пиридина. Поновите горњу операцију 10 пута. Користите 30 мл ДЦМ, 30 мл МеОХ Оперите преостале заштићене пептиде на смоли три пута узастопно. помоћу ТЛЦ или ХПЛЦ Проверите остатке од чишћења. Комбиновати сав филтрат и испарити растварач под сниженим притиском да се остави 5% запремине. додати 40 мл воде и ледено{16}}охлађену смешу да би се олакшало таложење. Након филтрирања, опрати производ чистом водом три пута и ставити га у вакуумску кутију за сушење за употребу. КОХ или П2О5 Оставите да се осуши.

разређена сирћетна киселина:

користите АцОХ/ТФЕ/ДЦМ (2:2:6) Третирајте пептиде који висе на смоли раствором за сечење током 2 сата, филтрирајте смолу и оперите смолу три пута раствором за сечење. Додати 15 пута већу запремину н-хексана у мешани филтрат и ротационо упарити да би се уклонио вишак сирћетне киселине. Методе опоравка пептида су детаљно описане у наставку.

Применљива смола:2- ЦТЦ смола